ABSTRACT
Asymbiotic germination is considered an efficient and viable technique that can increase germination rates. The effect of type and concentration of disinfestants, and the exposure time to disinfestants may differ according to the plant species. Therefore, species-specific standardization of disinfestation agent and procedure is necessary to achieve optimal germination rates. The objective of this study was to determine a disinfestation methodology to increase in vitro germination rates and the early development of seedlings of Dendrobium nobile and Dendrobium phalaenopsis, using different times for seed disinfestation and different culture media. Seeds were disinfected by soaking in a 0.8% sodium hypochlorite solution for 5 or 15 min under aseptic conditions, after which seed suspensions were either washed with water or left unwashed. Next, they were seeded in culture flasks containing four different culture media (MS, ½MS, K, and VW). The flasks were then transferred to a growth room under controlled photoperiod and temperature, where they remained under an irradiance of 20 µmol m-2 s-1. Germination rates of the species were evaluated 45 days after placement in the culture flasks. A higher germination rate was observed when the seeds were triple washed, regardless of the culture medium or soaking time. Seed soaking disinfestation for 5 min is also recommended. MS and ½MS media were the most effective culture media in promoting in vitro germination of the species under study.
A germinação assimbiótica é considerada uma técnica eficiente e viável resultando em elevados percentuais de germinação. Apesar do sucesso dessa técnica, o tipo, a concentração e o tempo de exposição do agente desinfestante diferem, necessitando padronização para cada espécie. Assim, a padronização do agente desinfestante e do procedimento são necessários para o aumento das taxas germinativas. Objetivou-se com este trabalho determinar metodologia que aumente a taxa de germinação in vitro e favoreça o desenvolvimento inicial de plântulas de Dendrobium nobile e Dendrobium phalaenopsis, utilizando diferentes métodos de desinfestação de sementes e diferentes meios de cultura. Sementes, sob condições assépticas, foram desinfestadas em solução de hipoclorito de sódio a 0,8%, por cinco ou quinze minutos. Após esses períodos, as suspensões de sementes receberam ou não a tríplice lavagem com água. Em seguida, foram semeadas em frascos de cultivo que continham quatro diferentes meios de cultura (MS, MS½, K e VW). Posteriormente, foram transferidos para sala de crescimento com fotoperíodo e temperatura controlados, onde permaneceram sob irradiância de 20 µmol m-2 s-1. Quarenta e cinco dias após a semeadura foi avaliada a porcentagem de germinação das espécies estudadas. Os resultados neste trabalho indicam que, independentemente do meio de cultura ou do tempo de desinfestação, as sementes quando submetidas à tríplice lavagem apresentaram porcentagem de germinação superior a àquelas que não receberam este procedimento. Recomenda-se a desinfestação das sementes por 5 minutos. Os meios MS e MS½ foram os mais efetivos em promover a germinação in vitro dessas espécies.
Subject(s)
Sodium Hypochlorite , Germination , Orchidaceae , Dendrobium , Gardening ProductsABSTRACT
The aims of this study were to analyze the initial germination aspects and evaluate the effect of sucrose concentrations on in vitro growth of Cattleya violacea. Mature seeds from closed pods were sowed on MS (Murashige and Skoog) culture medium. The external morphology of seed and plantlets were documented by light and scanning electron microscopy. Plantlets with 90 days after sowing were subcultured on ½ MS (with half-strength macronutrients concentrations) culture medium with different sucrose concentrations (0, 10, 20, 30 and 40 g L-1), incubated under the same in vitro conditions during more 150 days followed by the evaluation of root number, root length, shoot length, fresh and dry weight. The biometric data were statistically analyzed and regression curves constructed. The seeds showed reticulate seed coat with a micropylar (opened) and chalazal (closed) end; the embryo results a chlorophyllated tuberiforme structure called protocorm, which may have rhizoids, leaflets and is considered plantlet when it has root. Absence of sucrose or the highest evaluated sucrose concentration was detrimental for plant growth. The concentration of 27 g L-1 provided the highest in vitro growth enabling great efficiency for mass propagation of this species of high ornamental potential.
O presente estudo teve por objetivo analisar os aspectos da germinação e avaliar o efeito de concentrações de sacarose no crescimento in vitro de Cattleya violacea. Sementes provenientes de cápsulas fechadas foram semeadas em meio de cultura Murashige e Skoog (MS) e a morfologia externa da semente à plântula foi fotodocumentada em estereomicroscópio e microscópio eletrônico de varredura. Plântulas com 90 dias após a semeadura foram repicadas em meio de cultura ½ MS (com metade da concentração de macronutrientes) com diferentes concentrações de sacarose (0, 10, 20, 30 e 40 g L-1), incubadas nas mesmas condições in vitro por mais 150 dias e em seguida as plântulas foram avaliadas quanto ao número de raízes, comprimento da maior raiz, número de folhas, comprimento da parte aérea, massa fresca e seca total. Os dados biométricos foram submetidos à análise estatística e a eles ajustadas curvas de regressão. As sementes apresentaram testa reticulada com uma extremidade micropilar (aberta) e calazal (fechada); o embrião originou uma estrutura tuberiforme clorofilada denominada protocormo que pode apresentar rizóides, folíolos e quando provido de raiz é considerado plântula. A ausência de açúcar ou a maior concentração avaliada de sacarose foram prejudiciais ao crescimento da planta. A concentração de 27 g L-1 proporcionou maior crescimento in vitro possibilitando maior eficiência para a propagação massal dessa espécie de elevado potencial ornamental.